ICS 65.080 G 20 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 22924—2008 复混肥料（复合肥料）中缩二脲 含量的测定 Determination of biuret content for compound fertilizers(complex fertilizers) 2009-08-01实施 2008-12-31发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T22924—2008 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由中国石油和化学工业协会提出。 本标准由全国肥料和土壤调理剂标准化技术委员会（SAC/TC105）归口。 本标准起草单位：济宁市质量技术监督局、山东省化工研究院、国家化肥质量监督检验中心（上海）、 金沂蒙集团有限公司。 本标准主要起草人：纪胜、崔爱红、韩书雷、邱娟、吴明燕、杨一、干朋玲、李世慧、孙大勇、段苏然、 黄宾。 本标准为首次发布， GB/T22924—2008 复混肥料（复合肥料）中缩二脲 含量的测定 1范围 本标准规定了复混肥料（复合肥料）中缩二脲含量测定的试验方法：液相色谱法、分光光度法。 本标准适用于基础肥料中含有尿素的复混肥料（复合肥料）中缩二脲含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8571复混肥料实验室样品制备 HG/T2843化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液 3试验方法 3.1一般规定 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682规定的三级水。 分析中所用标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按HG/T2843的规定制备。 3.2高效液相色谱法 3.2.1方法提要 采用反相液相色谱法，用紫外检测器，外标法计算缩二的含量。 3.2.2试剂和溶液 3.2.2.1甲醇：色谱纯； 3.2.2.2磷酸二氢钾； 3.2.2.3缩二脲： 称取约15g缩二脲（化学纯）于烧杯中，加入500mL体积分数为95%乙醇中，加热溶解，趁热过 滤，滤液浓缩至250mL，冷却至5℃，使结晶析出，过滤，在105℃下烘干备用。在3.2.6规定的条件下 应无杂质峰； 3.2.2.4磷酸溶液：30g/L； 3.2.2.5氢氧化钾溶液：40g/L； 3.2.2.6磷酸二氢钾溶液：10g/L； 称取10g磷酸二氢钾溶解人1L水中，用磷酸溶液或氢氧化钾溶液调节pH=6.0，摇匀，用 0.45μm滤膜过滤，备用。 3.2.2.7流动相：甲醇5mL+磷酸二氢钾溶液95mL，使用前用0.45μm滤膜过滤，并超声脱气； 3.2.2.8缩二脲标准溶液：0.5mg/mL 称取0.5g（准确至0.0002g）缩二脲（3.2.2.3），溶解于不含二氧化碳的水中，转移至1L容量瓶 中，用水稀释至刻度，摇匀。该标准溶液使用前制备。 3.2.2.9洗脱液：水10mL+甲醇90mL，使用前用0.45μm滤膜过滤，并超声脱气。 1 GB/T22924—2008 3. 2. 3 仪器设备 一般实验室仪器和下列仪器。 3.2.3.1超声波清洗器； 3.2. 3.2 高效液相色谱仪：带紫外检测器； 3微量注射器：10μL～50μL； 3.2. 3. 3 3.2.3.4针头过滤器：备孔径0.45μm水相微孔滤膜； 3.2.3. 5 5μL定量环。 3.2.4试样的制备 按GB/T8571规定制备。 3.2.5分析步骤 3.2.5.1缩二脲标准系列溶液的配制 按表1所示，分别移取0.00mL、0.50mL、1.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL缩二脲标准溶 液（3.2.2.8）置于6个25mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。用0.45um水相微孔滤膜，过滤， 备用。 表 1 缩二脲标准溶液体积/mL 对应的缩二脲含量/mg 0.00* 0.00 0.50 0. 25 1. 00 0.50 3.00 1. 50 5.00 2.50 10. 00 5.00 a试剂空白溶液， 3.2.5.2试样溶液的制备 称取试样0.1g~0.5g（准确至0.0002g，以含缩二1mg~2mg为宜）于25mL烧杯中，加人 10mL流动相，超声波清洗器超声10min，转移至25mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，静置， 用针头过滤器过滤，得试样溶液 3.2.5.3高效液相色谱分析条件 推荐的高效液相色谱操作条件见表2，典型高效液相色谱图参见附录A。其他能达到同等分离程 度的高效液相色谱操作条件均可使用。 表 2 色谱柱 可耐纯水相的色谱柱，具有Cis填料（粒度为5μm），柱长250mm，内径4.6mm 流速 1. 2 mL/min 进样量 5 μL 柱温 室温 检测波长 200nm 可根据装置不同，气候条件不同，选择最佳分离条件。 3.2.6定量测定 3.2.6.1标准曲线的绘制 参照仪器操作条件，将液相色谱仪调节至最佳测定状态。分别进样5L，测定缩二脉系列标准溶 2 GB/T22924—2008 液（3.2.5.1）。每个标准溶液重复测定三次。以测得的峰高或峰面积均值分别对应缩二脲质量（mg）绘 制标准曲线或求得线性回归方程。 3.2.6.2试样的测定 用测定标准系列的操作条件测定试样溶液，测得峰高或峰面积值后，由标准曲线或线性回归方程得 试样溶液中缩二脲质量（mg）。测定完成后，首先用洗脱液冲洗系统30min，然后用甲醇冲洗系统 30min，最后按仪器操作规程关闭仪器 3.2.7结果计算 缩二脲的质量分数01，数值以%表示，按式（1）计算： .(1) m 式中： ml———与试料峰面积或峰高相对应的由标准曲线查出或由线性回归方程计算出的缩二脲的质量 的数值，单位为毫克（mg）； mi 试料的质量的数值，单位为克（g）。 取平行测定结果的算术平均值为测定结果 3.3分光光度法 3.3.1方法提要 用无水乙醇作溶剂，利用超声波提取试样中的缩二脲，在硫酸铜、酒石酸钾钠的碱性溶液中生成紫 红色配合物，在波长为550nm处测定吸光度，得试样中缩二脲的含量。 3.3.2试剂和溶液 3.3.2.1无水乙醇。 3.3.2.2过氧化氢。 SAC 3.3.2.3酒石酸钾钠碱性溶液：100g/L；称取80g氢氧化钠溶解于500mL水中，冷却，加人100g酒 石酸钾钠（NaKC,H,O。·4H,O)溶解后，用水稀释至1L，混匀，静置过夜，使用前过滤。 3.3.2.5缩二脲标准溶液：2mg/mL；称取2g（准确至0.0002g）缩二脲（3.3.2.2)溶解于不含二氧化 碳的水中，转移至1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。该标准溶液使用前制备。 3.3.3仪器设备 一般实验室仪器和下列仪器 3.3.3.1电热干燥箱：可控温度在105℃土2℃； 3.3.3.2超声波清洗器； 3.3.3.3恒温水浴：可控温度在30℃士5℃； 3.3.3.4分光光度计，带有光程为3cm的吸收池，可在550nm处测量。 3.3.4分析步骤 3.3.4.1试样制备 按GB/T8571规定制备试样。 3.3.4.2标准曲线的绘制 3.3.4.2.1标准比色溶液的配制 按表3所示，分别移取0.00mL（为补偿溶液）、2.50mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL、 后依次加入10.0mL酒石酸钾钠碱性溶液和10.0mL硫酸铜溶液，稀释至刻度，摇匀。置于30℃土 5℃的水浴中，不时摇动下，保持20min。 3