ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 28643—2012 饲料中二英及二噁英类多氯联苯的测定 同位素稀释-高分瓣气相色谱/高分瓣 质谱法 Determination of PCDD/Fs and dioxin-like PCBs in feeds- Isotope dilution HRGC/HRMS 2012-07-31发布 2012-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 28643—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准主要参考了美国环境规划署（USEPA）颁布的1613B（Tetra-throughocta-chlorinateddiox- ins andfurans by isotopedilutionHRGC/HRMS,1997)和1668A(Chlorinated biphenyl congeners in water，soil，sediment，andtissuebyHRGC/HRMS，1999）方法，以及《欧盟关于饲料的分类及其中二 英和二嗯英类多氯联苯的限量标准》（Directive2002/32/EC，lastamendedin3February2006）文件。 油脂类样品中二英和二英类多氯联苯的测定参考GB/T5009.205一2007《食品中二英及其类似 物毒性当量的测定》。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。 本标准起草单位：中国科学院生态环境研究中心、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 【国家饲料质量监督检验中心（北京）、国家环境分析测试中心、中国科学院大连化学物理研究所 本标准主要起草人：张庆华、杨曙明、刘爱民、倪余文、王璞、李兰、贾铮、李英明。 A I GB/T28643—2012 饲料中二英及二英类多氯联苯的测定 同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨 质谱法 1范围 本标准规定了用同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨质谱法测定饲料中17种2，3，7，8-氯取代的 多氯代二苯并二英（PCDDs）和多氯代二苯并呋喃（PCDFs）（以下简称PCDD/Fs）以及12种二英类 多氯联苯(DL-PCBs)（见表A.1和表A,2)的方法。 本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料以及饲料添加剂。 本标准方法分析饲料中PCDD/Fs和DL-PCBs的检测限见表B.1 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T5009.205一2007食品中二英及其类似物毒性当量的测定 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 应用加速溶剂提取和索氏提取等技术提取样品中的PCDD/Fs和DL-PCBs，提取液经过复合硅胶 柱、碱性氧化铝柱等填装色谱柱净化、浓缩后，用高分辨气相色谱/高分辨质谱进行分析检测，同位素稀 和DL-PCBs的毒性当量（TEQ）。 4试剂和材料 除非另有规定，在分析中均使用农残级（pesticideresidue）试剂和符合GB/T6682规定的一级 用水。 4.1正已烷。 4.2二氯甲烷。 4.3甲苯。 4.4壬烷。 4.5浓硫酸（优级纯）。 4. 6 氢氧化钠（优级纯）。 1 GB/T28643—2012 4.7标准溶液。 4.7.1PCDD/Fs同位素标记定量内标标准溶液：PCDD/Fs的同位素标记定量内标溶液浓度见表 C.1.分析测试中可直接使用，无需稀释。 4.7.2PCDD/Fs同位素标记的回收率内标标准溶液：PCDD/Fs的同位素标记回收率内标溶液 (13C-1，23，4-TCDD和13C-12.3.7,8,9-HxCDD)浓度见表C.2，分析测试中可直接使用。 4.7.3PCDD/Fs精密度和回收率检查标准溶液（PAR）：用王烷配制的含天然PCDD/Fs溶液（见 表C.3），用于检测过程中精密度和回收率试验（OPR）。 定校正标准溶液，可以获得天然与同位素标记PCDD/Fs的相对响应因子（RRF）。CS3可用于已建立 RRF的日常校正和校正曲线校验；CSI可用于检查HRGC/HRMS应具备的灵敏度。 4.7.5DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液：DL-PCBs的同位素标记定量内标溶液浓度见表C.5。 分析测试中应稀释后使用。 4.7.6DL-PCBs同位素标记的回收率内标标准溶液：DL-PCBs的同位素标记回收率内标溶液浓度见 表C.6。分析测试中应稀释后使用。 4.7.7DL-PCBs精密度和回收率检查标准溶液（PAR）：用王烷配制的含天然DL-PCBs溶液（见 表C.7，用于检测过程中精密度和回收率试验（OPR)。 4.7.8DL-PCBs校正标准溶液：为含有天然和同位素标记的DL-PCBs系列校正溶液（见表C.8)。其中 CS3可用于已建立RRF的日常校正和校正曲线校验，CS1可用于检查HRGC/HRMS应具备的灵敏度。 4.8硅胶。 4.8.1活性硅胶：使用前在550℃下活化12h，于干燥器中密封保存，1个月内使用。 4.8.2酸性硅胶（质量分数为40%）：称取60g活性硅胶（4.8.1）于烧瓶中，用滴管逐滴加入40g浓硫 酸（4.5）并不断摇动使其较均匀混合，再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡，直至硅胶呈均匀流动状 态，密封保存于干燥器中，1个月内使用。 4.8.3酸性硅胶（质量分数为30%）：称取70g活性硅胶（4.8.1）于烧瓶中，用滴管逐滴加入30g浓硫 酸（4.5)并不断摇动使其较均匀混合，再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡，直至硅胶呈均匀流动状 态，密封保存于干燥器中，1个月内使用。 4.8.4碱性硅胶：称取100g活性硅胶（4.8.1)于烧瓶中，称取1.2g氢氧化钠（4.6）于烧杯中，并加入 30mL水，混匀后用滴管逐滴加人到硅胶中，再将烧瓶加塞后振荡至硅胶呈均匀流动状态，密封保存于 干燥器中，1个月内使用。 4.10弗罗里土：60目~100目，使用前在140℃下烘烤至少7h，取出后1h内使用。 4.11活性炭（质量分数为18%）： 活性炭：CarbopackC,Supelco102581，或其他等同类型。 分散剂：Celite545coarse，Fluka2214o，或其他等同类型。 称取9.0gCarbopackC和41.0gCelite545coarse充分混和，在130℃下活化至少6h，于干燥器 中密封保存，1个月内使用。 4.12无水硫酸钠：在660℃下灼烧至少6h，于干燥器中密封保存，1个月内使用。 5仪器与设备 实验室常用仪器设备及以下设备： 5.1高分辨气相色谱/高分辨质谱仪（HRGC/HRMS）。 1）给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则 可使用这些等效产品。 2 GB/T28643—2012 5. 2 旋转蒸发器。 5. 3 氮气浓缩器。 5. 4 超声波清洗器。 5.5 振荡器（摇床）。 5. 6 加速溶剂提取仪，压力：10.3MPa(1500psi)~13.7MPa(2000psi)，温度：100℃～200℃。 5.7 天平：感量0.01g；0.1mg。 5.8 烘箱：能够在105℃～250℃范围内保持恒温（士5℃）。 5. 9 马弗炉：能够在200℃～700℃范围内保持恒温（土10℃）。 5.10 0玻璃层析柱：带聚四氟乙烯柱塞，底部装有砂芯，150mmX8mm（内径），300mm×15mm (内径)。 5.11自动凝胶渗透色谱（GPC）：净化柱（内径15mm～20mm），内装70gS-X3凝胶（200目~ 400目）。 6采样和试样制备 按GB/T14699.1进行样品采集；按GB/T20195制备试样，过0.28mm孔筛。 7分析步骤 7.1提取 7.1.1饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料和饲料添加剂（提供铜源的饲料 添加剂及其预混合饲料除外）的提取 样品的提取采用加速溶剂提取法。称取样品10.0g（准确至0.01g），与10g无水硫酸钠（4.12）混 合均匀，转移至加速溶剂提取仪（5.6）的不锈钢萃取池中，分别加人PCDD/Fs和DL-PCBs的13C标记 定量内标（4.7.1和4.7.5），进行提取。 提取条件： 提取溶剂：正已烷（4.1）：二氯甲烷（4.2）=1：1（体积比），100mL； b) 压力：10.3MPa(1500psi); 温度：120℃； d) 加热时间：7min；静态提取时间：8min；吹扫时间：2min； 循环3次； e) 样品收集于250mL接收瓶中。 也可采用其他等效的提取方法。 7.1.2提供铜源的饲料添加剂及其预混合饲料的提取 样品提取采用索氏提取法。称取样品20.0g（准确至0.01g），与10g无水硫酸钠（4.12）混合均 匀，转移至垫有1cm活性硅胶（4.8.1)的索氏提取筒中，分别加入PCDD/Fs和DL-PCBs的1C标记定 量内标（4.7.1和4.7.5），置于索氏提取器中进行提取。 提取条件： a） 提取溶剂：正已烷（4.1）：二氯甲烷（4.2）=1：1（体积比），250mL； b) 提取时间：18h~24h； c) 回流速度：3次/h~4次/h。 3 S