ICS13.040.30 C30 中华人民共和国国家标准 GB/T16293—2010 代替GB/T16293—1996 医 药工业洁净室(区) 浮游菌的测试方法 Testmethodforairbornemicrobeinclean room(zone)ofthepharmaceuticalindustry 2010-09-02发布 2011-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 测试方法 1 ………………………………………………………………………………………………… 5 测试规则 3 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(规范性附录) 洁净室(区)采样点布置 6 ………………………………………………………… 附录B(规范性附录) 培养基的灭菌及准备 7 …………………………………………………………… 附录C(资料性附录) 洁净室(区)浮游菌技术要求 10 …………………………………………………… ⅠGB/T16293—2010 前 言 本标准参考了ISO14698-1《洁净间以及相关环境控制 第1部分:微生物控制》、ISO/TS11133- 1:2000(英文版)《食品和动物饲料的微生物学 培养基制备和生产指南 第1部分:实验室培养基制备 的质量保证通用指南》、JGJ71—1990《洁净室施工及验收规范》而制定。 本标准代替GB/T16293—1996《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》。 本标准与GB/T16293—1996的主要区别为: ———增加了“纠偏限度actionlevels”和“警戒限度alertlevels”等术语; ———根据ISO/TS11133-1:2000(英文版)标准,采用培养基平皿存放规则。 ———增加了确定最少采样点数目的方法。 ———本标准修改了4.8.3.2,改为“4.10.2 采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采 样后,在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于2d;采用沙氏培养基(SDA)配制的培养皿经 采样后,在20℃~25℃培养箱中培养,时间不少于5d。” ———增加了5.8“日常监控”的内容,增加了洁净室(区)空气微生物浓度控制的纠偏限度和警戒限 度的设立和确定取样频次的方法。 本标准的附录A、附录B是规范性附录。 本标准的附录C是资料性附录。 本标准由国家食品药品监督管理局提出并归口。 本标准起草单位:上海市食品药品包装材料测试所,中国食品药品检定研究院医疗器械检验中心。 本标准主要起草人:梁炜、徐敏凤、冯晓明、潘杰青。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T16293—1996。 ⅢGB/T16293—2010 医药工业洁净室(区) 浮游菌的测试方法 1 范围 本标准规定了医药工业洁净室和洁净区中浮游菌测试条件、测试方法。 本标准适用于医药工业洁净室和洁净区,无菌室或局部空气净化区域(包括沽净工作台)的浮游菌 的测试和环境的验证。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T16292—2010 JGJ71—1990 洁净室施工及验收规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 菌落 colonyformingunits 微生物培养后,由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落,简称CFU。通常用个数表示。 3.2 浮游菌 airbornemicrobe 用本标准提及的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子,通过专门的培养基,在适宜的生长条件下 繁殖到可见的菌落数。 3.3 浮游菌浓度 airbornemicrobeconcentration 单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少,以计数浓度表示,单位是个/m3或个/L。 3.4 纠偏限度 actionlevels 对于受控的洁净室(区),由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时,应启动监 测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 3.5 警戒限度 alertlevels 对于受控的洁净室(区),由使用者自行设定一个微生物含量等级,从而给定了一个与正常状态相比 最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时,应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关 措施。 4 测试方法 4.1 方法提要 本标准采用的方法是计数浓度法。即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养基(选择 1GB/T16293—2010 能证实其能够支持微生物生长的培养基),经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数, 以判定该洁净室的微生物浓度。 4.2 人员的职责及培训 洁净室(区)的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室(区)测试的职 责,其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室(区)的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式,外面的衣服 不能带进100000级以上的区域。 4.3 仪器、辅助设备和培养基 选择合适的浮游菌采样器,包括采用无油的抽气泵,较低的气流流速和较大的采样流量,以保证培 养基表面的水分不被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下: a) 浮游菌采样器; b) 培养皿; c) 培养基(见本标准附录B); d) 恒温培养箱; e) 高压蒸汽灭菌器。 4.4 浮游菌采样器原理 浮游菌采样器一般采用撞击法机理,可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。狭缝式采样器 由内部风机将气流吸入,通过采样器的狭缝式平板,将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基 表面上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转,气流从采样 器前部吸入从后部流出,在离心力的作用下,空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培 养条上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入,盖子上是 密集的经过机械加工的特制小孔,通过风机将收集到的细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上,附 着的活微生物粒子经培养后形成菌落。 4.5 测试要点 4.5.1 必须按照测试仪器的检定周期,定期对仪器作检定。使用校验合格,且在使用有效期内的仪器。 4.5.2 测试仪器在未进入被测区域时,若必需,则先清洁表面,或在相应的洁净室内准备和存放(用保 护罩或其他适当地外罩保护仪器)。 4.5.3 在100级洁净室内用纸时,上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物,在100级洁净室内不能用铅 笔和橡皮。 4.5.4 使用测试仪器时应严格按照仪器说明书操作。 4.5.4.1 仪器开机,预热至稳定后,方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正,同时检查采样流量,并 根据采样量设定采样时间。 4.5.4.2 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。 4.5.4.3 采样管严禁渗漏,内壁应光滑。 4.5.4.4 采样管的长度应根据测点的高度定,尽量减少弯曲。 4.6 培养皿 4.6.1 一般采用ϕ90mm×15mm规格的培养皿。可根据所选用采样器选择合适的培养皿。 4.6.2 离心式采样器采用专用的固形培养条。 4.7 培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)或沙氏培养基(SDA)或其他用户认可并经验证了的培养基。其配 制方法见附录B。 2GB/T16293—2010