ICS11.220 B41 中华人民共和国国家标准 GB/T27641—2011 马 螨病诊断技术 Diagnostictechniquesforhorsemange 2011-12-30发布 2012-04-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。 本标准起草单位:中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中国动物卫生与流行病学中心。 本标准主要起草人:梁成珠、朱来华、郑小龙、肖西志、邓明俊、岳志芹、毕道荣、梁君妮、徐彪。 ⅠGB/T27641—2011 马螨病诊断技术 1 范围 本标准规定了马螨病临床检查、病原样品采集与鉴定等诊断技术要求。 本标准适用于马螨病的检疫和诊断。 2 临床检查 2.1 临床特征 马患本病时,先由头、颈、体侧开始,随后蔓延至肩、背、全身,足螨则主要寄生于四肢的下半部。主 要表现为皮肤发痒,骚动不安,舔、咬、踢瘙痒部,常倚物摩擦;被毛凌乱,拨开患部被毛,患部皮肤出现结 节、水泡,破溃后形成痂皮,被毛脱落,皮肤肥厚,皱褶,病马日渐消瘦。在诊断中,可观察动物是否有用 嘴轻咬或摩擦患处皮肤的表现。在拥挤的围栏中强迫动物运动,使机体发热,促进皮肤吸收螨虫的抗原 或刺激物(分泌物),激发临床症状。 2.2 初步判定 2.2.1 根据临床症状如剧痒、皮肤增厚、有痂皮、脱毛和消瘦等特征可做出初步判定。 2.2.2 当发现可疑马匹时,需继续观察或采取病料送实验室进一步病原学检查。 3 病原样品采集与鉴定 3.1 设备、器械与试剂 3.1.1 设备、器械 显微镜(100×)、恒温箱(4℃~60℃)、离心机(离心速度3000r/min)、酒精灯、凸刃小刀、棉拭子、 骨科刮勺、自封袋、平皿、试管、载玻片等。 3.1.2 试剂 甘油或液体石蜡、10%氢氧化钾(钠)溶液、60%硫代硫酸钠溶液等。 3.2 显微镜检查 3.2.1 病料的采集 3.2.1.1 保定马匹,将患部与健康部交界处被毛剪掉,用通过火焰灭菌的凸刃小刀倾斜45°刮取裸露 部皮屑直到皮肤微出血为止。收集刮下的病料进行实验室检查。 3.2.1.2 用适当大小的棉拭子插入外耳道直到遇到阻力,然后轻轻地旋转并退出。插入外耳道要轻柔 细心,注意马匹的反应。或用骨科刮勺刮取马耳内廓耳垢。 3.2.1.3 将皮屑和耳垢迅速转移到自封袋或平皿内密封后送往实验室待检。 3.2.1.4 采集病料前,滴一滴甘油或液体石蜡在皮肤或器具上有助于螨虫的收集。 1GB/T27641—2011 3.2.2 检查方法 3.2.2.1 直接检查法 取适量病料,37℃恒温箱中作用15min~30min,直接放在平皿上进行镜检。 3.2.2.2 温水检查法 将病料浸入40℃~45℃的水中,置恒温箱内,在温热水的作用下,螨虫由皮屑或耳垢内爬出,集成 团而沉入水底,1h~2h后,将浸过病料的液体倒出,将沉渣倾入平皿中镜检。 3.2.2.3 沉淀法 将采集的病料置于试管中,加入10%氢氧化钾(钠)溶液,在酒精灯上煮数分钟(或浸泡2h),然后 2000r/min离心沉淀5min,弃上清液,吸取沉淀物,放在载玻片上,进行镜检。 3.2.2.4 漂浮法 将采集的病料置于试管中,加入10%氢氧化钾(钠)溶液,煮沸数分钟(或浸泡2h),然后2000r/min 离心沉淀5min,弃上清液,取沉淀物,用蒸馏水将其中的氢氧化钾(钠)浸洗干净,在沉淀物中加入60% 硫代硫酸钠溶液使液体满于管口,但不溢出。静置5min~10min,螨即浮集于液面,可用载玻片直接蘸 取镜检。 3.3 结果判定 在显微镜下检查,发现有螨虫体(卵)为阳性结果,未发现螨虫体(卵)为阴性结果(参考附录A和 附录B)。四种检查方法只要一种方法鉴定为阳性,则判定为阳性结果。 2GB/T27641—2011 附 录 A (资料性附录) 螨虫的形态示意图 图A.1 Sarcopticmangemite 疥螨 图A.2 Femalescabiesmitewithegg 雌性疥螨和虫卵 3GB/T27641—2011 图A.3 Sarcoptesscabies,male.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雄性疥螨 图A.4 Sarcoptesscabiei,female.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雌性疥螨 图A.5 Psoroptes,male.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雄性痒螨 4GB/T27641—2011 图A.6 Psoroptes,female.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雌性痒螨 图A.7 Chorioptes,male.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雄性足螨或皮螨 图A.8 Chorioptes,female.CourtesyofDr.DietrichBarth,Merial 雌性足螨或皮螨 5GB/T27641—2011 图A.9 螨的卵(未发育) 图A.10 螨的卵(已发育) 6GB/T27641—2011