ICS65.020.01 B16 中华人民共和国国家标准 GB/T28074—2011 苹果蠹蛾检疫鉴定方法 DetectionandidentificationofCydiapomonella(L.) 2011-12-30发布 2012-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前　　言 　　本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局、中华人民共 和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国山西出入境检验 检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:陈乃中、张祥林、梁帆、曹逸霞、魏春艳、李惠萍、李建光、张伟、张俊华、马菲。 ⅠGB/T28074—2011 苹果蠹蛾检疫鉴定方法 1　范围 本标准明确了苹果蠹蛾Cydiapomonella(L.)的取样、饲养、成虫生殖器解剖和鉴定等方法。 本标准适用于进出境植物检疫、国内植物检疫和大田防治工作中的苹果蠹蛾的取样、饲养和鉴定。 2　苹果蠹蛾基本信息 学名Cydiapomonella(L.)。 异名LaspeyresiapomonellaL.。 俗名codlingmoth。 属鳞翅目Lepidoptera,卷蛾科Tortricidae,新小卷蛾亚科Olethreutinae,小食心虫族Grapholitini, 小卷蛾属Cydia。 幼虫随果实传带是主要传播途径,老熟幼虫或蛹也可能随包装材料传带。 相关种类有苹果异形小卷蛾Cryptophlebialeucotreta(Meyrick)、樱小卷蛾Cydiapackardi (Zeller)、苹小食心虫CydiainopinataHeinrich、李小食心虫Cydiafunebrana(Treitschke)和梨小食心 虫Cydiamolesta(Busck)等。 苹果蠹蛾的其他信息参见附录A。 3　方法原理 根据苹果蠹蛾的危害状,在检疫现场或发生苹果蠹蛾的果园肉眼观察寄主果实,取得幼虫或蛹虫 样,饲养蛹获得成虫,解剖制作外生殖器标本,用显微镜观察,根据形态特征对种类进行判定。如果有可 资鉴定的老熟幼虫,可根据老熟幼虫鉴定;如果仅发现蛹,则将蛹饲养出成虫再做鉴定;如果成虫前翅鳞 片不够完整不能准确判断,则进行外生殖器解剖再做鉴定。 4　器材与试剂 70%酒精、体视显微镜、手持放大镜、昆虫针、解剖刀、解剖针、载玻片、盖玻片、塑料盒(管)、细沙、小 毛笔、玻璃纸、展翅板、10%氢氧化钠、酒精、二甲苯、加拿大胶、乙醚、氰化钾毒瓶、控温控湿培养箱。 5　检测与饲养 5.1　果实表面检查 肉眼观察或用手持放大镜观察寄主果实表皮有无细小突起伤疤、虫孔、虫粪或流胶。 5.2　剖果检查 将疑似被害果实,用解剖刀将果实剖开,检查果实内是否有幼虫(见附录B)。如发现疑似幼虫,用 70%酒精浸泡,带回实验室。 1GB/T28074—2011 5.3　包装材料检查 在检疫现场,检查包装材料上有无老熟幼虫或蛹。如发现疑似幼虫,用70%酒精浸泡,如发现蛹, 可用指形管盛装,带回实验室。 5.4　蛹的培养 将蛹置于有透气孔的塑料盒(管)内的湿细沙表层中,将塑料盒(管)置于养虫箱内,以25℃~ 30℃、相对湿度为65%的条件饲养至成虫羽化。在容器内投入滴有乙醚的棉球将蛾晕倒,将蛾取出置 于氰化钾毒瓶内,使之真正死亡。然后针插,使用小毛笔和玻璃纸展翅制成针插标本,供鉴定。 6　标本的制作准备 6.1　成虫针插标本 针插成虫标本,供鉴定。 6.2　成虫外生殖器玻片标本 将成虫腹部取下,浸泡在10%氢氧化钠水溶液中,煮沸5min,取出解剖,去掉与外生殖器无关的体 壁、肌肉、内脏等,再放到75%、85%、95%和100%酒精中各10min,最后置于二甲苯中透明,整形,再放 到载片上,滴加拿大胶,盖片风干,加贴标签。 7　实验室鉴定 用体视显微镜观察将幼虫标本,用手持放大镜或体视显微镜观察成虫标本,或用显微镜观察成虫外 生殖器玻片标本,判断是否符合以下形态特征(见附录B、附录C和附录D)。 7.1　成虫 7.1.1　概貌 体长8mm,翅展19mm~20mm,体灰褐色而带紫色光泽。雄蛾色深、雌蛾色浅。 7.1.2　头部 复眼深棕褐色。头部具有发达的灰白色鳞片丛;下唇须向上弯曲,第2节最长,末节着生于第2节 末端的下方。 7.1.3　翅 前翅翅基部淡褐色;外缘突出略呈三角形,在此区内杂有较深的斜行波状纹;翅的中部颜色最浅,也 杂有波状纹。臀角处的肛上纹呈深褐色,椭圆形,有3条青铜色条斑,其间显出4条~5条褐色横纹,这 是本种外形上的显著特征。雄蛾前翅腹面中室后缘有一黑褐色条斑,雌蛾无。后翅深褐色,基部较淡。 7.1.4　外生殖器 7.1.4.1　雄 抱器瓣在中间有明显颈部;抱器腹在中部有明显凹陷,其外侧有一指状尖突;抱器端圆形,具有许多 长毛;阳茎短粗,基部稍弯;阳茎针6枚~8枚,分两行排列。 2GB/T28074—2011 7.1.4.2　雌 产卵瓣内侧平直,外侧弧形;交配孔宽扁;后阴片圆大;囊导管短粗,在近口处强烈几丁质化,扩大呈 半圆;囊突两枚,牛角状。 7.2　卵 椭圆形,扁平,中央略隆起;初产时半透明,后期卵上可见一圈红色斑纹,卵壳上有很细的皱纹。 7.3　幼虫 老熟幼虫体长14mm~18mm。幼龄幼虫淡黄白色,渐长呈淡红色。头部黄褐色,两侧有较规则 的褐色斑纹。前胸气门前毛片上有3根毛(L毛)。胸足跗爪背侧刚毛短于跗爪。腹部第8节与9节每 侧SV毛数量通常为2∶1,第9节L毛3根,第3根通常着生在单独的毛片上。腹足趾钩单序(几乎同 一长度)环状,外侧通常有缺口。肛上板较前胸背板浅,上面有淡褐色斑点,无臀栉(肛上板腹面梳齿状 骨化刺)。 苹果蠹蛾及其重要近缘种幼虫的鉴别见附录D。 7.4　蛹 长7mm~10mm,黄褐色。通常雌大于雄。雌腹3节可活动,而雄4节可动。第2~7腹节背面各 有两排整齐的刺,前排粗大,后排细小,第8~10腹节背面则各有1排刺。腹末有臀栉。 8　结果判定 以老熟幼虫或成虫形态特征为依据,符合上述7.1.3或7.1.4.1或7.1.4.2或7.3者可判定为苹 果蠹蛾。 9　样本保存 鉴定后的标本要永久保存,并加注明时间、地点、寄主、采集人等信息的标签。幼虫可保存在70% 的酒精中。 3GB/T28074—2011 附　录　A (资料性附录) 苹果蠹蛾其他信息 A.1　主要寄主 苹果、榅桲、杏、李、桃、梨等。 A.2　生物学 雌蛾多产卵在果树上层的果实和叶片上。幼虫孵出后,从果萼、果胴、果蒂等部位蛀入果内,取食果 肉和种子。幼虫共5龄。幼虫老熟后,往往近直线钻出脱果,在树干皮下、裂缝处或地上隐蔽物内或土 中结茧化蛹。以末代老熟幼虫在树干皮下、裂缝处等处越冬,翌年春季化蛹、羽化。被害寄主果实可见 细小突起伤疤或虫孔,有时虫孔处还可见虫粪或流胶。 A.3　地理分布 目前已广泛分布于全球各大洲寒温带地区,仅我国北方大部分省区还没有发现,具体分布地区: 欧洲:阿尔巴尼亚、奥地利、白俄罗斯、比利时、保加利亚、塞浦路斯、捷克、斯洛伐克、丹麦、爱沙尼 亚、芬兰、法国(包括科西嘉岛)、德国、希腊、匈牙利、爱尔兰、意大利(包括撒丁岛、西西里岛)、拉脱维亚、 立陶宛、马耳他、摩尔多瓦、荷兰、挪威、波兰、葡萄牙(包括亚逊尔群岛、马德拉群岛)、罗马尼亚、俄罗斯 联邦(俄罗斯欧洲部分、俄罗斯远东、西伯利亚)、塞黑、斯洛伐克、西班牙(包括加那利群岛)、瑞典、瑞士、 乌克兰、英国(英格兰和威尔士、北爱尔兰、苏格兰)。 亚洲:阿富汗、亚美尼亚、阿塞拜疆、乔治亚共和国、印度(喜马偕尔邦、克什米尔、北方邦)、伊朗、伊 拉克、以色列、约旦、哈萨克斯坦、吉尔吉斯斯坦、黎巴嫩、巴基斯坦、叙利亚、塔吉克斯坦、土耳其、土库曼 斯坦、乌兹别克斯坦等地。中国新疆、甘肃等局部地区也已有发生。 非洲:阿尔及利亚、埃及、利比亚、毛里求斯、摩洛哥、南非、突尼斯。 北美洲:美国(加利福尼亚、伊利诺斯、印第安那、爱荷华、马萨诸塞、密歇根、密苏里、纽约、北卡罗莱 那、俄亥俄、俄勒冈、宾夕法尼亚、犹他、维吉尼亚、华盛顿、西维吉尼亚、威斯康星)、加拿大(大不列颠哥 伦比亚、新不伦瑞克、新斯科舍、安大略、爱德华王子岛、魁北克)、墨西哥。 南美洲:阿根廷、玻利维亚、巴西(巴拉那、南里奥格兰德、圣卡塔琳娜)、智利、哥伦比亚、秘鲁、 乌拉圭。　 大洋洲:澳大利亚(新南威尔士、昆士兰、南澳、塔斯马尼亚、维多利亚、西澳)、新西兰。 4GB/T28074—2011 附　录　B (规范性附录) 苹果蠹蛾图 图B.1　苹果蠹蛾成虫 图B.2　苹果蠹蛾幼虫及苹果果实种子被害状 5GB/T28074—2011 附　录　C (规范性附录) 重要形态特征示意图 C.1　卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征 卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征示意图见图C.1。 a)　小食心虫族前翅斑纹示意图(引自刘友樵) b)　新小卷蛾亚科雄抱器瓣(引自刘友樵)　　　　　　　　　　　　c)　苹果蠹蛾雄外生殖器的阳茎(上) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　和抱器(仿前苏联) 　　d)　雌外生殖示意器(引自刘友樵)　　　　　　　　　　　　　　e)　苹果蠹蛾雌外生殖器(仿前苏联) 图C.1　卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征示意图 6GB/T28074—2011