书 书 书犐犆犛 １１ ． ０４０ ． ５５ 犆犆犛犆 ４４ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ４１５２１ — ２０２２ 多指标核酸恒温扩增检测微流控芯片通用技术要求 犌犲狀犲狉犪犾狋犲犮犺狀犻犮犪犾狉犲狇狌犻狉犲犿犲狀狋狅犳犿犻犮狉狅犳犾狌犻犱犻犮犮犺犻狆犳狅狉犿狌犾狋犻犻狀犱犲狓狀狌犮犾犲犻犮犪犮犻犱犻狊狅狋犺犲狉犿犪犾犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲犮狋犻狅狀 　 ２０２２  ０７  １１ 发布 ２０２２  ０７  １１ 实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本文件按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２０２０ 《 标准化工作导则 　 第 １ 部分 ： 标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由全国生物芯片标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ４２１ ） 归口 。 本文件起草单位 ： 博奥生物集团有限公司 、 北京博奥晶典生物技术有限公司 、 四川大学华西医院 、 首都医科大学附属佑安医院 、 北京大学人民医院 、 清华大学 。 本文件主要起草人 ： 潘良斌 、 邢婉丽 、 李为民 、 高占成 、 程京 、 辛娟 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ４１５２１ — ２０２２ 多指标核酸恒温扩增检测微流控芯片通用技术要求 １ 　 范围 本文件规定了多指标核酸恒温扩增检测微流控芯片的分类和命名 ， 要求 ， 试验方法 ， 标志 、 标签和说明书 ， 包装 、 运输和贮存的要求 。 本文件适用于以微流控芯片为载体的多指标核酸恒温扩增检测产品 。 本文件不适用于含其他生物功能模块的微流控芯片产品 ， 如包含核酸提取 、 核酸纯化等功能的微流控生物芯片产品 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。 其中 ， 注日期的引用文件 ， 仅该日期对应的版本适用于本文件 ； 不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ１９１ 　 包装储运图示标志 ＧＢ ／ Ｔ２１４１５ — ２００８ 　 体外诊断医疗器械 　 生物样品中量的测量 　 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性 ＧＢ ／ Ｔ２９７９１．１ 　 体外诊断医疗器械 　 制造商提供的信息 （ 标示 ） 　 第 １ 部分 ： 术语 、 定义和通用要求 ３ 　 术语和定义 ＧＢ ／ Ｔ２１４１５ — ２００８ 、 ＧＢ ／ Ｔ２９７９１．１ 界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 微流控芯片 　 犿犻犮狉狅犳犾狌犻犱犻犮犮犺犻狆 以硅 、 玻璃 、 金属材料 、 高分子聚合物等材料为芯片基材 ， 利用微纳加工 、 精密注塑等加工技术加工而成 ， 其中包括一个或多个微管道 、 微阀 、 微反应池等功能单元 ， 能够完成芯片内液体流动的精准操控 ， 从而实现某种特定生化反应功能的生物芯片 。 ［ 来源 ： ＧＢ ／ Ｔ２７９９０ — ２０１１ ， ２．２．２ ， 有修改 ］ ３ ． ２ 　 多指标核酸恒温扩增检测 　 犿狌犾狋犻犻狀犱犲狓狀狌犮犾犲犻犮犪犮犻犱犻狊狅狋犺犲狉犿犪犾犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲犮狋犻狅狀 某种方法或产品可对一份样品中的多个 （ 通常为 ２ 个以上 ） 待检测核酸靶序列在恒定的温度下同时进行扩增和检测 。 　　 注 ： 待检测核酸靶序列来自细菌 、 病毒 、 寄生虫 、 真菌等某一类别中的多个核酸靶序列 ， 或者来自多个类别中的多个 核酸靶序列 。 ３ ． ３ 　 多指标核酸恒温扩增检测微流控芯片 　 犿犻犮狉狅犳犾狌犻犱犻犮犮犺犻狆犳狅狉犿狌犾狋犻犻狀犱犲狓狀狌犮犾犲犻犮犪犮犻犱犻狊狅狋犺犲狉犿犪犾犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犱犲狋犲犮狋犻狅狀 设计有多个并列的微反应池 （ 通常为 ５ 个以上 ） 以及连接这些微反应池的微管道 ， 并在微反应池内 １ 犌犅 ／ 犜 ４１５２１ — ２０２２ 包埋可与特定待检靶核酸序列进行特异性结合的引物或 （ 和 ） 探针 ， 加入含有待检样本的反应液后 ， 在恒定的温度下 ， 微反应池内可完成多个 （ 通常为 ２ 个以上 ） 待检测核酸靶序列扩增和检测的微流控芯片 。 ３ ． ４ 阳性质控 　 狆狅狊犻狋犻狏犲犮狅狀狋狉狅犾 用来质控整个检测过程 （ 如核酸提取 、 核酸扩增反应等 ） 是否正常的试剂 。 　　 注 ： 一般包括阳性对照 、 内参对照 。 阳性对照通常包含一段与待检样本无关的核酸制品及可与该核酸制品进行特 异性结合的引物或 （ 和 ） 探针 ， 置于芯片上的微反应池内 ， 用于监测核酸扩增过程是否正常 。 内参对照通常为可与特定样本来源 （ 如人体细胞 ） 靶序列进行特异性结合的引物或 （ 和 ） 探针 ， 置于芯片上的微反应池内 ， 用来 监测样本核酸提取等前处理过程是否正常 。 ３ ． ５ 　 生物相容性 　 犫犻狅犮犪犿狆犪狋犻犫犻犾犻狋狔 材料与生物试剂之间相互作用后产生的各种复杂的生物 、 物理 、 化学等反应及其对生物反应过程和反应结果的影响的一种性能 。 ３ ． ６ 透光性 　 犾犻犵犺狋狋狉犪狀狊犿犻狊狊犻狅狀 特定波段的光谱透过芯片材质的能力 。 ３ ． ７ 光强度检测重复性 　 狉犲狆犲犪狋犪犫犻犾犻狋狔狅犳犾犻犵犺狋犻狀狋犲狀狊犻狋狔犱犲狋犲犮狋犻狅狀 对相同种类 、 质量或体积的同一份标准荧光 （ 或浊度 ） 物质进行多次重复检测 ， 其荧光信号 （ 或浊度引起的光强变化 ） 检测值的一致性 。 ３ ． ８ 标准荧光物质 　 狀狅狉犿犪犾犳犾狌狅狉狅犮犺狉狅犿犲 由短波长激发光激发 ， 可以释放出可见光的试剂 。 示例 ： 常见的标准荧光物质有 ＦＡＭ 、 ＨＥＸ 、 ＶＩＣ 、 Ｃｙ３ 、 ＲＯＸ 、 纳米材料 、 量子点等 。 ３ ． ９ 密封性 　 犾犲犪犽狋犻犵犺狋狀犲狊狊 芯片及其附属材料防止内装物溢出或其他物质进入的特性 。 ３ ． １０ 准确性 　 犪犮犮狌狉犪犮狔 测量结果与被测量真值之间的一致性程度 。 ［ 来源 ： ＧＢ ／ Ｔ２１４１５ — ２００８ ， ３．１ ］ ３ ． １１ 特异性 　 狊狆犲犮犻犳犻犮犻狋狔 能专一检测被测物的试验能力 ， 即当样本中不存在目标核酸时则不会被检出 ， 实际验证中采用假阳性率进行考核 。 ３ ． １２ 检测限 　 犱犲狋犲犮狋犻狅狀犾犻犿犻狋 ； 犾犻犿犻狋狅犳犱犲狋犲犮狋犻狅狀 最低检测限 　 犿犻狀犻犿狌犿犱犲狋犲犮狋犲犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀 样本中以一定概率可被检测到的与零有差异的被测量的最低值 。 　　 注 ： 本文件中的检出限为区别于零的样本不低于 ９５％ 检出的最低浓度值 。 ［ 来源 ： ＹＹ ／ Ｔ１１８２ — ２０２０ ， ３．３ ， 有修改 ］ ３ ． １３ 重复性 　 狉犲狆犲犪狋犪犫犻犾犻狋狔 在相同测量条件下 ， 在芯片内对多份相同种类 、 质量或体积的标准核酸样本进行核酸扩增检测 ， 连 ２ 犌犅 ／ 犜 ４１５２１ — ２０２２ 续多次测量所得结果之间的一致性 。 ３ ． １４ 实时稳定性 　 狊狋犪犫犻犾犻狋狔狅犳狉犲犪犾狋犻犿犲犪犵犻狀犵 长期稳定性 　 犾狅狀犵狋犲狉犿狊狋犪犫犻犾犻狋狔 芯片及试剂在生产企业规定界限内真实贮存条件下保持其质量特性的能力 ， 超过此期限即认为失效 。 　　 注 １ ： 稳定性适用于芯片 、 生物试剂和参考品的生产 、 运输 、 保存和使用 。 　　 注 ２ ： 芯片的稳定性通常用时间量化 。 ３ ． １５ 包装运输稳定性 　 狊狋犪犫犻犾犻狋狔狅犳狆犪犮犽犻狀犵犪狀犱狋狉犪狀狊狆狅狉狋犻狀犵 芯片及试剂在生产企业规定的包装条件下 ， 在指定运输流通过程中保持其质量特性的能力 。 ４ 　 分类和命名 ４ ． １ 　 分类 按照检测技术可分实时荧光法 、 终点荧光法 、 浊度法 、 显色法检测微流控芯片等 ； 按照样本通量可分为单样本芯片 、 二样本芯片 、 多样本芯片 ， 按照待检靶核酸序列来源 ， 可分为细菌 、 病毒 、 寄生虫 、 真菌核酸检测微流控芯片等 。 ４ ． ２ 　 命名 具体产品命名由检测方法和待检靶核酸名称组成 ， 例如 ， 实时荧光法细菌核酸检测微流控芯片 、 终点荧光法病毒核酸检测微流控芯片 。 ５ 　 要求 ５ ． １ 　 外观 ５ ． １ ． １ 　 芯片及芯片产品外观清洁 、 无影响产品质量特征的明显划痕 、 破损等可见缺陷 ， 特别是功能结构区域 。 ５ ． １ ． ２ 　 芯片产品包装应外观清洁 、 无泄漏 、 无破损 ， 标志 、 标签字迹清楚 。 ５ ． ２ 　 微反应池数量及容积 一张芯片上应设置一个或多个样本检测单元 ， 用来检测一个或多个样本 。 一个样本检测单元内应至少包含 ５ 个微反应池 ， 各个微反应池的容积可相同或不同 ， 所容纳的液体体积应为 ０．８ μ Ｌ ～ ３０ μ Ｌ 。 ５ ． ３ 　 芯片材质透光性 芯片微反应池检测窗口位置对检测波长的光谱的透过性 ， 应不小于芯片自身材料光谱透过率的 ８０％ 。 ５ ． ４ 　 光强度检测重复性 对于荧光检测的芯片 ， 用同一份标准荧光 （ 或浊度 ） 物质进行连续重复性测定 ， 各检测微反应池最后 １０ 次连续荧光信号测量值的变异系数 ＣＶ 应不大于 １０％ 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ４１５２１ — ２０２２ ５ ． ５ 　 生物相容性 在正常试验条件下 ， 芯片及其附属材料应不影响生物性能检测结果 。 ５ ．